В каких клетках образуются антитела. Строение иммуноглобулинов. Классы иммуноглобулинов
Антигены – это вещества, которые несут признаки генетически чужеродной информации и при введении в организм вызывают развитие специфических иммунологических реакций.
Антигенные вещества представляют собой высокомолекулярные соединения, обладающие определенными свойствами: чужеродностью, антигенностью, иммуногенностью, специфичностью и определенной молекулярной массой. Антигенами могут быть разнообразные вещества белковой природы, а также белки в соединении с липидами и полисахаридами. Антигенными свойствами обладают клетки животного и растительного происхождения, яды животного и растительного происхождения. Антигенными свойствами обладают вирусы, бактерии, микроскопические грибы, простейшие, экзо - и эндотоксины микроорганизмов. Все антигенные вещества имеют ряд общих свойств:
Антигенность – это способность антигена вызывать иммунный ответ . Степень иммунного ответа организма на различные антигены неодинакова, т. е. на каждый антиген вырабатывается неодинаковое количество антител.
Специфичность – это особенность строения веществ, по которой антигены отличаются друг от друга. Ее определяет антигенная детерминанта, т. е. небольшой участок молекулы антигена, который соединяется с выработанным на него антителом.
Иммуногенность - это способность создавать иммунитет. Это понятие относится, главным образом, к микробным антигенам, обеспечивающим создание иммунитета к инфекционным болезням. Антиген, чтобы быть иммуногенным, должен быть чужеродным и иметь достаточно большую молекулярную массу. С увеличением молекулярной массы иммуногенность нарастает. Корпускулярные антигены (бактерии, грибы, эритроциты) более иммуногены, чем растворимые. Среди растворимых антигенов наибольшей иммуногенность обладают высокомолекулярные соединения.
Антигены подразделяют на полноценные и неполноценные. Полноценные антигены вызывают в организме синтез антител или сенсибилизацию лимфоцитов и вступают с ними в реакцию как in vivo, так и in vitro. Для полноценных антигенов характерна строгая специфичность, т. е. они вызывают в организме выработку только специфических антител, вступающих в реакцию только с данным антигеном.
Неполноценные антигены (гаптены) представляют собой сложные углеводы, липиды и другие вещества, не способные вызвать образование антител в организме, но вступающие с ними в специфическую реакцию. Добавление к гаптенам небольшого количества белка придает им свойства полноценного антигена.
Аутоантигены – антигены, образованные из белков собственных тканей, изменивших свои физико-химические свойства под воздействием различных факторов (токсины и ферменты бактерий, лекарственные вещества, ожоги, обморожения, облучение). Такие, измененные белки становятся чужеродными для организма, и организм отвечает выработкой антител, т. е. возникают аутоиммунные заболевания.
Если рассматривать антигенные свойства микроорганизма, то можно отметить, что антигенный состав – это достаточно постоянная характеристика любого микроорганизма. В антигеном комплексе чаще всего встречаются общеродовые антигены (общие для представителей данного рода), группоспецифические (присущие определенной группе), видоспецифические (присущие всем особям данного вида), и штаммоспецифические.
По локализации антигены могут быть поверхностные (К-антигены – антигены клеточной стенки), соматические (О-антигены, локализованы во внутреннем слое клеточной стенки, термостабильны) и жгутиковые (Н-антигены, присутствуют у всех подвижных бактерий, термолабильны). Многие из них активно секретируются клеткой в окружающую среду. В тоже время, существуют гидрофобные антигены, прочно связанные с клеточной стенкой.
Кроме того, патогенные микроорганизмы способны выделять ряд экзотоксинов. Экзотоксины обладают свойствами полноценных антигенов с выраженной неоднородностью в пределах рода и вида. Споры бактериальной клетки также обладают антигенными свойствами: они содержат антиген, общий для вегетативной клетки и споры.
Патогенные микроорганизмы ведут постоянную борьбу с иммунной системой путем изменения структуры поверхностных антигенов. Изменения чаще всего появляются в результате точечных мутаций, в результате появляются варианты существующих антигенов.
Антитела
В процессе эволюции организмы выработали набор защитных приспособлений к патогенным микроорганизмам, включающие неспецифические механизмы, препятствующие проникновению патогенов, вещества неспецифически повреждающие их (лизоцим, комплемент), фагоцитоз и другие клеточные реакции. Вместе с тем, патогенные микроорганизмы тоже научились преодолевать неспецифические барьеры. Поэтому в процессе эволюции появились специфические гуморальные факторы защиты в виде антител и способность организма к выраженному специфическому иммунному ответу.
Антитела – белки, относящиеся к иммуноглобулинам, которые синтезируются лимфоидными и плазматическими клетками в ответ на попадание в организм антигена, обладающими способностью специфически связываться с ним. Антитела составляют более 30% белков сыворотки крови, обеспечивают специфичность гуморального иммунитета благодаря способности связываться только с тем антигеном, который стимулировал их синтез.
Первоначально антитела условно классифицировали по их функциональным свойствам на нейтрализующие, лизирующие и коагулирующие. К нейтрализующим были отнесены антитоксины, антиферменты и вируснейтрализующие лизины. К коагулирующим – агглютинины и преципитины; к лизирующим – гемолитические и комплементсвязывающие антитела. С учетом функциональной способности антител были даны названия серологическим реакциям: агглютинация, гемолиз, лизис, преципитация и др.
В соответствии с Международной классификацией сывороточные белки, несущие функцию антител, получили название иммуноглобулинов (Ig). В зависимости от физикохимических и биологических свойств различают иммуноглобулины классов IgM, IgG, IgA, IgE, IgD.
Иммуноглобулины – белки с четвертичной структурой, т. е. их молекулы построены из нескольких полипептидных цепей. Молекула каждого класса состоит из четырех полипептидных цепей – двух тяжелых и двух легких, связанных между собой дисульфидными мостиками. Легкие цепи – структура общая для всех классов иммуноглобулинов. Тяжелые цепи имеют характерные структурные особенности, присущие определенному классу, подклассу.
Антитела, входящие в определенные классы иммуноглобулинов, обладают различными физическими химическими, биологическими и антигенными свойствами.
Иммуноглобулины содержат три вида антигенных детерминант: изотипические (одинаковые для каждого представителя данного вида), аллотипические (детерминанты, различные у представителей данного вида) и идиотипические (детерминанты, определяющие индивидуальность данного иммуноглобулина и являющиеся различными у антител одного класса, подкласса). Все указанные антигенные различия определяются с помощью специфических сывороток.
Синтез и динамика образования антител
Антитела вырабатывают плазматические клетки селезенки, лимфатических узлов, костного мозга, пейеровых бляшек. Плазматические клетки (антителопродуценты) происходят из предшественников В-клеток после их контакта с антигеном. Механизм синтеза антител аналогичен синтезу любых белков и происходит на рибосомах. Легкие и тяжелые цепи синтезируются отдельно, затем соединяются на полирибосомах, а окончательная их сборка происходит в пластинчатом комплексе.
Динамика образования антител. При первичном иммунном ответе в антителообразовании различают две фазы: индуктивную (латентную) и продуктивную. Индуктивная фаза – это период от момента парентерального введения антигена до появления антигенреактивных клеток (продолжительность не более суток). В эту фазу происходит пролиферация и дифференцировка лимфоидных клеток в направлении синтеза IgM. Вслед за индуктивной фазой наступает продуктивная фаза антителообразования. В этот период, примерно до 10…15 суток уровень антител резко возрастает, при этом уменьшается число клеток, синтезирующих IgM, и нарастает продукция IgA.
Феномен взаимодействия антиген-антитело.
Знание механизмов взаимодействия антигенов и антител раскрывает сущность многообразных иммунологических процессов и реакций, возникающих в организме под влиянием патогенных и непатогенных факторов.
Out of 5 based on 28 votes
Синтезируются четырьмя типами клеток В-ряда, различаемыми морфологически. В-лимфоцит - непролиферирующая клетка, которая синтезирует иммуноглобулины и экспрессирует их на поверхности мембраны, где они играют роль специфических рецепторов. Плазматические и лимфоплазмоцитоидные клетки представляют собой конечный этап дифференцировки В-лимфоцита. Эти клетки не делятся и секретируют большое количество иммуноглобулинов.
Непосредственными предшественниками плазматических клеток являются плазмобласты (иммунобласты). Они образуются на этапе антигензависимой дифференцировки В-лимфоцита или В-клетки памяти, сохраняют способность к делению и детерминированы к превращению в плазмоцит. Таким образом, они обеспечивают увеличение клона в процессе иммунного ответа на антиген. Количество продуцируемых ими иммуноглобулинов зависит от клеточного окружения и регуляторных взаимодействий. Наконец, В-бласт - это клетка, которая также появляется из клонированного В-лимфоцита в процессе иммунного ответа на антигенную стимуляцию. В отличие от плазмобласта эта клетка сохраняет способность превращаться, помимо плазмоцита, в В-клетку памяти.
В онтогенезе в результате многоэтапной антигеннезависимой дифференцировки стволовой кроветворной клетки образуется клонированный В-лимфоцит, т. е. клетка, несущая на своей поверхности иммуноглобулиновые рецепторы определенной специфичности, благодаря которым она способна реагировать на воздействие антигена. Сначала клеткой экспрессируются рецепторы IgM (sIgM), а на более поздней стадии дифференцировки (после этапа негативной селекции на аутоантигены) образовавшиеся зрелые В-лимфоциты приобретают дополнительно IgD-рецепторы (sIgD).
Важно отметить, что с момента клонирования данный В-лимфоцит и все его потомки (т. е. собственно клон) будут синтезировать иммуноглобулины, характеризующиеся одним и тем же идиотипом (строение и специфичность активного центра) и типом L-цепей.
Связанные с мембраной иммуноглобулины отличаются по структуре от секретируемых иммуноглобулинов. Так, мембранный IgM является мономером, а не пентамером, как сывороточный IgM. Кроме того, Н-цепи slg имеют в С-концевой части дополнительный участок, играющий роль якоря и отсутствующий у сывороточных иммуноглобулинов соответствующего класса.
Около 90 % синтезируемого В-лимфоцитами иммуноглобулина связано с мембраной. Только очень небольшое количество IgM секретируется в виде мономера. Вероятно, происходит не активная секреция, а спонтанное отщепление мембранного IgM в результате ограниченного протеолитического процесса на клеточной поверхности. Таким образом, зрелые В-лимфоциты являются иммуноглобулинсинтезирующей, но не секретирующей клеточной формой.
Взаимодействие мембранных иммуноглобулиновых рецепторов с родственным антигеном включает антигензависимый этап дифференцировки В-лимфоцита, конечной формой которого является плазматическая клетка. Она практически не имеет поверхностных иммуноглобулиновых рецепторов, не способна к делению, живет всего 2-3 дня, зато характеризуется развитой цитоплазмой и выраженной эндоплазма-тической сетью. Ее функции - синтез и секреция иммуноглобулинов. Скорость синтеза в каждой плазматической клетке достигает 2000 молекул в секунду.
Отдельная плазматическая клетка синтезирует целую молекулу иммуноглобулина - Н- и L-цепи, а в случае полимерных форм иммуноглобулинов - также и J-цепь. В каждый данный момент одна клетка синтезирует иммуноглобулин только одного класса и одного типа; обнаружение клетки, секретирующей сразу два класса иммуноглобулинов, является редкостью и связано с моментом переключения изотипов. Кроме того, клетка функционирует по принципу одна клетка - одно антитело. Следовательно, специфичность секретируемых антител, т. е. структура VH- и VL-участков, остается всегда той же, что и структура V-областей мембранного иммуноглобулина-рецептора.
Синтез иммуноглобулинов в плазматических клетках происходит на полирибосомах зернистой эндоплазматической сети, причем Н- и L-цепи синтезируются отдельно. Сборка молекулы происходит в цистернах эндоплазматической сети и занимает 20- 30 мин. В это время отдельные цепи собираются в молекулы, формируются дисульфидные связи, под действием ферментов присоединяются сахара, образуются полисахаридные группы иммуноглобулинов. Затем в результате экзоцитоза происходит секреция готовых молекул.
Процесс сборки может проходить несколькими путями . Например, сначала может образоваться димер Н-цепей Н2, к которому последовательно присоединяются две L-цепи; либо образуются две полумолекулы HL, которые, объединяясь попарно, формируют полную мономерную молекулу. Все эти промежуточные структуры обнаружены при изучении миеломных и IgG-продуцирующих лимфоидных клеток мыши. Кроме того, установлено, что клетки как мышиной, так и человеческой миеломы часто синтезируют значительно большее количество L-цепей, чем Н-цепей. В таких случаях клетка секретирует как целые молекулы иммуноглобулина, так и свободные L-цепи, чаще всего в виде мономеров и димеров. При изучении клеточных линий с блоком сборки и секреции Н- и L-цепей обнаружено, что при невозможности формирования полноценной молекулы секреция Н-цепей прекращается.
Интересно, что в миеломных клеточных линиях происходит постепенное накопление спонтанных мутаций, сопровождающихся потерей способности клетки продуцировать Н-цепи. Можно предположить, что клон, секретирующий только L-цепи, является результатом повторной мутации опухолевой клетки, синтезировавшей полный иммуноглобулин. Вторая мутация сопровождается потерей способности клетки к синтезу Н-цепей.
ПАТОЛОГИЯ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ
На прошлой лекции мы с Вами говорили о механизмах реактивности и резистентности. Сегодня Мы продолжим эту тему и поговорим о иммунологической реактивности. Знание этого механизма очень важно для врача. С одной стороны, его правильное функционирование является одной из важнейших предпосылок здоровья, с другой стороны, патология иммунологической реактивности является источником многих бед и лежит в основе патогенеза огромного числа болезней.
Термин ИММУНИТЕТ и ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ РЕАКТИВНОСТЬ происходит от слова иммунный, что во времена древнего Рима обозначало - свободный от подателей. В дальнейшем иммунными стали называть людей невосприимчивых к инфекционным заболеваниям. А,стало быть,под механизмами иммунитета понимали механизмы резистентности организма к микрофлоре. В настоящее время понятие иммунитет несколько усложнилось, и имеет ряд разночтений. Прежде всего это касается таких терминов как: специфические и неспецифические механизмы иммунитета. Несколько слов о неспецифических механизмах иммунитета или, как сейчас их чаще называют, естественные факторы резистентности . Их можно разделить на 2 группы: 1)ГУМОРАЛЬНЫЕ; 2)КЛЕТОЧНЫЕ
1.Гуморальные механизмы естественной резистентности. Гумор Вы знаете жидкость - поэтому гуморальными называют вещества,которые находятся в жидкостях организма: кровь, лимфа, интерстициальная и спинно-мозговая и прочие жидкости; они, эти вещества находятся в жидкостях организма. К таким факторам относятся: а)ЛИЗОЦИМ; б)ЛИЗИНЫ; в)ИНТЕРФЕРОНЫ; г)различного рода протеолитические , гидролитические ферменты; д)СИСТЕМА ПРОПЕРДИНА; е)СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА и некоторые другие.Все эти вещества, всегда в больших или меньших количествах находятся в крови и оказывают бактерицидное и бактериостатическое действие. Неспецифическим они называются потому , что они подавляют жизнедеятельность на какого-то отдельного вида микроорганизмов, а достаточно больших групп микроорганизмов.В этом плане, а также по механизму своего воздействия на микрофлору, эти вещества близки к антибиотикам. Действуют они таким образом, что за счет присущей им ферментативной активности они либо разрушают оболочку микроорганизмов, либо нарушают процессы метаболизма микробной клетки. Напр.,ЛИЗОЦИМ - способен разрушать МУРАМЕИНОВУЮ КИСЛОТУ и следовательно будет подавлять жизнедеятельность тех микроорганизмов в структуру клеточных стенок которых входит мурамхиновая кислота. Комплемент обладает выраженной протеолитической активностью и также способен разрушать оболочки микробных клеток. Нормальная концентрация факторов естественной резистентности весьма важна для организма. При врожденных или приобретенных дефицитах одного, или нескольких из этих факторов происходит снижение резистентности организма по отношению к микрофлоре. Повышение их количества создает предпосылки для возникновения так называемых аутоагрессивных процессов , приводящих к повреждению собственных клеток организма. Особенно в этом плане большое значение имеет система комплемента и система пропердина. К клеточным факторам неспецифической резистентности относится ФАГОЦИТОЗ.
СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ
Специфической иммунологической резистентностью называют способность организма специфически реагировать на чужеродные субстанции, называемые антигенами . В качестве антигенов могут выступать микроорганизмы, чужеродные клетки, продукты функционирования чужеродных клеток и микроорганизмов, белки, полисахариды,нуклеопротеиды и др. Функцией иммунитета является поддержание антигенного гомеостаза организма. Это значит, что иммунокомпетентная система должна обнаружить и уничтожить любое вещество или любую клетку, которая хотя бы минимально отличающуюся от здоровых клеток или белков своего организма. Зачем организму нужно такое строгое поддержание своего единообразия? Дело в том, что организм высокоразвитых животных состоит из сотен миллиардов клеток. Клетки делятся, а любой процесс в природе протекает с какой-то долей брака. Если предположить, что брак в процессе клеточного деления составляет одну миллионную долю процента, то и тогда, в организме каждого из нас образуется в сутки многие миллионы атипичных клеток. Кроме того, любая клетка организма, в том числе и здоровая, в процессе жизни стареет, может провреждаться и также становится атипичной. Ну, а, что такое нетипичная клетка? Во-первых, эта клетка,невыполняющая присущие ей функции. Во-вторых, эти клетки очень часто выходят из-под контроля организма, растут, живут и размножаются сами по себе - являются источниками злокачественных и доброкачественных опухолей. Уничтожение этих атипичных клеток является одной из главных функций иммунокомпетентной системы. Второй функцией является защита организма от микроорганизмов и токсических продуктов их жизнедеятельности, а также всех прочих чужеродных белков и кропномолекулярных веществ, которые могут проникнуть в организм, напр., ядов змей или насекомых. Явления иммунологического уничтожения чужеродных клеток лежит в основе тканевой несовместимости, стоящей на пути решения проблемы пересадки тканей и органов. В основе механизма специфического иммунитета лежит процесс или образования антител или развитие клана сенсибилизированных лимфоцитов: в первом случае говорят, что иммунологическая реакция протекает по гуморальному пути ,т.к. антитело - белок,растворимый в плазме.Во втором случае по клеточному пути. В обоих случаях иммунологическая реакция начинается с попадания или возникновения в организме АНТИГЕНА. Что такое АНТИГЕН? АНТИГЕН это вещество несущее признаки чужеродной генетической информации или, если говорить проще, по своей химической структуре не имеющее аналогов среди веществ организма. Антиген может быть нелюбое в-во, а в-во имеющее определ. мол. массу. Различают полноценные антигены и неполноченные антигены или гаптены или комплексные антигены. Полноценные антигены при попадании в организм обладают способностью инициировать иммунологическую реакцию с начала до конца. На них вырабатываются антитела, которые в последующем с ними же соединяются.(от гречес. hapto - схватывать)- фрагменты мол.биополимера или искуств. синтезирование в-в. Гаптены сами не способны инициировать образование антител, но в том случае, если в организме уже есть к ним антитела, то гаптен соединяется с антителом. Не способны вызывать антителообразования при введении форм. Комплексные антигены могут образоваться при попадании в организм достаточно простых в химическом отношении веществ, например йода. Сам йод естественно не является антигеном - слишком мала его молекула. Но попав в организм йод соединяется с собственным белком организма, в результате образуется комлексный антиген.
ИММУНОКОМПЕТЕНТНАЯ СИСТЕМА - это совокупность всех лимфоидных клеток тела: вилочковая железа, селезенка, лимфотические узлы, пейеровы бляшки, лимфоциты костного мозга и периферической крови составляют единый орган иммунитета. Выделяют первичные и вторичные лимфоидные органы. К первичным относятся органы в которых протекают процессв образования и обучения лимфоцитов - это костный мозг, вилочковая железа и пейровы бляшкикишечника . Лимфоциты образуются в костном мозге, отсюда выходят в кровь и попадают либо в вилочковую железу в пейеровы бляшки, где происходит процесс обучения лимфоцитов. После обучения из Тимуса выходят Т-лимфоциты, которые способны генерировать иммунный ответ по клеточному типу. Из пейеровых бляшек, которые у человека являются аналогом Бурсы Фабриция, выходят Б-лимфоциты, способные синтезировать антитела. Клоны Т- и Б- лимфоцитов не являются однородными. Рассмотрим сначала клон Т-лимфоцитов. Среди Т-лимфоцитов различают
1) Т-КИЛЛЕРЫ (убийцы), которые непосредственно уничтожают атипичные клетки или микроорганизмы. Они являются основными эффекторными клетками, оказывающие цитотоксическое действие на клетки-мишени. Т-киллеры образуются в результате дифференцировки Т 2 - лимфоцитов, после стимуляцииклеточными антигенами . Поэтому Т-киллеры уничтожают клетки трансплантата и мутантные клетки организма, в том числе опухолевых. Механизм действия Т-киллеров полностью не расшифрован. Известно, что после контакта Т-киллеров с клетками-мишени, в этих клетках происходит необратимые изменения в результате осмотических нарушений. В самих же Т-киллерах даже после нескольких контактов с клетками- мишени видимых изменений не происходит, однако синтез ДНК прекаращается. Больше всего Т-киллеров находятся в лимфатических узлах.
2)Т-лимфоциты ХЕЛПЕРЫ (помошники) - они являются помощниками Т - киллеров и В-лимфоцитов. Т-хелперы неоднородны. Более зрелые из них являются хелперами Т-В, функция которых заключается в воздействии на определенный клон В-лимфоцитов. Хелперы Т-Т,более раниие по дифференцировке и способствуют пролиферации Т-киллеров и Т-лимфоцитов эффекторов гиперчувствительности замедленного типа. Т-хелперы оказывают влияние на другие клетки не только при непосредственном контакте, но и с помощью гуморальных медиаторов, при обязательном участии макрофагов. Установлено, что активные Т-хелперы выделяют интерлейкин (ИЛ) - 3,4,5,6., который усиливает цитотоксическое действие и дифференцировку киллеров, противоопухолевую активность макрофагов. Кроме того, Т-хелперы за счет ИЛ стимулируют В-лимфоцитов, рост и развитие тученых клеток,базофилав,эозифилов Т-хелперы играют важную роль. Они определяют направление и силу иммунного ответа. Их количество и активность при старении и опухолях, а увеличивается при аутоиммунных заболеваниях, системной красной волчанке, рассеянном склерозе, отторжении трансплантата.
3) Т-СУПР ЕССОРЫ (являются регуляторами направления и объема иммунной реакции. Они ограничивают пролиферацию клонов лимфатических клеток, угнетают антителообразования, дифференцировку киллеров, аллергический процесс и развития ГЗТ. Под влиянием супрессиров развивается состояние иммунологической толерантности к антигену. Кол-во Т-супрессоров увеличивается с возрастом при остром гепатите, при приживлении трансплантата.
4)АНТИГЕНЕРЕАКТИВНЫЕ Т-лимфоциты - они первыми из Т-лимфоцитов реагируют на присутствие антигена,выделяемют ИЛ-2 который стимулирует рост всех видов Т-лимфоцитов и активаторов НК-клеток (О-лимфоцитов и натуральных киллеров) Антигенереактивные Т-лимфоциты составляют основную массу Т-лимфоцитов периферической крови и лимфы. Они обладают высокой способностью к миграции. После встречи с антигеном эта клетка превращается в иммунобласт, который, выделяя ИЛ-2 медиаторы, содействует запуску иммунной реакции в ближайшем лимфатическом узле.При дефиците или отсутствия антигенереактивных Т-лимфоцитов нарушается процесс распознования антигена, что проявляется в снижении ответа на бактериальные, вирусные и грибковые антигены, появлении аутоиммуных расстройств.
5.Т-лимфоциты - КЛЕТКИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ПАМЯТИ. Клетки иммунологической памяти отличаются в функциональном отношении от АНТИГЕН-реактивных Т-клеток тем, что они узнают антиген в фазу вторичного иммуного ответа, при повторном контакте с антигеном. Причем реагируют на антиген раньше и значительно интенсивнее, чем при первом контакте.Т-клетки иммунологической памяти относятся к потомкам хелперов,супрессоров или киллеров и несут тот же фенотип мембранных антигенов.
6.Т-ЭФФЕКТОРЫ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА
(ГЗТ).Т-эффекторы ГЗТ в основном предназначены для секреции специальных веществ, гуморальных медиаторов - лимфокинов . Следует сказать, что гуморальные медиаторы синтезируются не только этими клетками, а практически всеми лимфатическими клетками и органами.Основная задача лимфокинов ИЛ состоит в обеспечении взаимодействия различных типов клеток и вовлечении их в иммунную реакцию.Лимфокины ИЛ могут заменить в некоторой степени функцию тех или иных субпопуляций лимфоцитов, обеспечивая при переносе реципиенту пассивный клеточный иммунитет. В настоящее время в клинической практике уже широко применяется лейкоцитарный интерферон , который оказывает не только противовирусное действие, но и некоторый цитотоксический эффект, так как интерферон в больших дозах нарушает синтез ДНК. Большинство Т-эффекторов ГЗТ находятся в селезенке.
7.Т-ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ЛИМФОЦИТЫ (Тd). Они непосредственно влияют на стволовые и колониеобразующие гемопоэтичечские клетки, влияют на дифференцировку гранулоцитарного и моноцитарного, эритроцитарного,тромбоциторного рядов. Тd - лимфоциты восстанавливают колониеобразующую функцию стволовой клетки, которая была подавлена различными путями. Дефицит Тd-хелперов и повышение Тd-супрессоров имеет важное значение при старении орг-ма,ряда врожденных иммунодефицитных состояний, гипо-и апластических синдромов.
8.Т-контрсупрессоры - препятствуют действию Т-супрессоров и следовательно,усиливают иммунный ответ. Какие же в целов выполняют функции Т-ЛИМФОЦИТЫ?
1.Т-лимфоциты узнают чужеродный антиген и дают сигнал к началу иммунного ответа (антигенреактивные клетки, клетки иммунологической памяти).
2.Для того, чтобы отличить свое от чужого, нужно по крайней мере знать свое. Поэтому второй функцией Т-лимфоцитов является функция иммунологической памяти.
3.Т-лимфоциты обеспечивают иммунологическую толерантность собственных тканей, т.е. они обеспечивают охрану собственных клеток и белков от того, чтобы по отношению к ним не развивалась иммунологическая реакция, т.е. обеспечивают борьбу с аутоиммунными процессами.
4.Т-лимфоциты участвуют в запуске иммуного ответа по гуморальному типу, запуская в работу соответствующего клона В-лимфоцитов, продуцирующих антитела.
5.Т-лимофциты обеспечивают клеточный механизм иммуноного ответа.
ЛИМФОКИН Ы, которые вырабатываются Т-эффекторами ГЗТ :
1.Фактор стимуляции бласттрансформации, усиливающий сенсибилизацию к антигену, действует на незрелые клетки тимуса;2.Фактор торможения бласттрансформации и синтеза ДНК, неспецифичен, по действию близок к лимфотоксину; 3.Фактор переноса,усиливает сенсибилизацию ко всем видам антигенов, препятствует развитию толерантности; 4.Факторы,усиливающие цитотоксичность,бактериостатическую активность, бактерицидность, а также агрегацию макрофагов; 5.Фактор торможения миграции макрофагов, выделяется не только Т-эффекторами, но и несколькими другими субпопуляциями лимфоцитов (в том числе и В-лимфоцитами). Основная функция фактора этого заключается в концентрации фагоцитирующих клеток в районе внедрения антигена и усиливания их бактерицидности; 6.Фактор,тормозящий адгезию макрофагов, фактор пролиферации макрофагов, фактор усилиния миграции макрофагов; 7.Фактор торможения миграции лейкоцитов; 8.Хемотаксический фактор, осуществляющие хемотаксис макрофагов,нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, фибропластов; 9.Колониестимулирующие факторы, влияющие на рост гранулоцитарного и эритроцитарного ростков???????? ; 10. Фибробластактивирующий фактор, вызывающий разрастание соединительной ткани вокруг зоны иммуной реакции. Иммунный интерферон синтезируется Т-клетками в присутствии Т-зависимых антигенов и митогенов. Его действие заключается в подавлении размножения вирусов, усиления ответа на Т-митогены, усилении фагоцитоза макрофагами, додавлении размножения и дифференцировки предшественников гранулоцитов, макрофагов, антителопродуцентов.
МЕХАНИЗМ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКЦИИ Попавший в кровь чужеродный антиген фагоцитируется макрофагами. В них антиген первого порядка расщепляется (в лизосомах) и фрагменты расщипленного антигена выходят из клетки. Часть этих фрагментов с так называемым белком взаимодействуют с молекулами мембран макрофага. Образуется комплекс на поверхности макрофага. Макрофаг выделяет вещество интерлейкин 1 - сигнал, поступающий к антигенореактивным Т-лимфоцитам. Т-лимфоциты-антигенореактивные вырабатывают рецептор к комплексу на поверхности макрофага (1 а -подобный белок + фрагмент антигена). Активированный антигенореак. Т-лимфоцит выделяет второе сингальное вещество – интерлейкин II .Интерлейкин II активирует Т-хелперы (помощники). Образуется два клона Т-хелперов. (3,4,5,6) Один клон продуцирует фактор роста В-лимфоцитов, другой клон - фактор дифференцировки В-лимфоцитов. После контакта с антигеном В-лимфоцит и переходит в возбужденное состояние, из крови он передвигается в лимфатические узлы. В лимфатических узлах возбужденный В-лимфоцит превращается в плазматическую клетку, которая синтезирует и выбрасывает в кровь антитела к данному антигену. Антитела, выделенные плазматическими клетками, свободно циркулируют в крови. В том случае, если в крови они встречаются с собственными антигенами, развивается конечный этап иммунологической реакции - обоазование иммунного комплекса антиген-антитело. Т-лимфоциты супрессоры способны тормозить процессвозбуждения В-лимфоцитов, а значит и блокировать весь последующий ход событий. Однако цепь интересующих нас событий на этом не заканчивается. Дело в том, что образование иммуного комплекса для организма является не целью, а средством. В самом деле, давайте представим, что например, к певмококку, клетке,состоящей из миллиардов белковых молекул не станет ни жарко ни холодно. Поэтому, после этапа образования иммунного комплекса наступает этап уничтожения иммунного комплекса вместе с антигеном, входящим в его состав. Механизмы уничтожения иммунного комплекса могут быть так же в который раз: 1.ГУМОРАЛЬНЫЕ и 2.КЛЕТОЧНЫЕ. Клеточный механизм - это главным образом фагоцитоз. После присоединения антитела к микроорганизму, он теряет свою подвижность, нарушается структура его оболочки, что естественно облегчает процессы фагоцитоза. Гуморальный путь разрушения иммунного комплекса обусловлен воздействием на него ферментов плазмы крови, например комплемента. Вы помните, что после образования комплекса к нему присоединяется комплемент, и после сложного процесса активации комплемента, он превращается в активнейший протеолитический фермент, который повреждает оболочку микроорганизма, тем самым способствует его уничтожению. В целом нужно сказать, что иммунный комплекс штука для организма далеко не безвредная. Поэтому, если нарушается процесс разрушения, элиминации иммунного комплекса из организма, формируется одна из форм иммунопатологии так называемая болезни иммунных комплексов.
ОБЩИЕ ТЕОРИИ ИММУНИТЕТА Мы с Вами с начала и до конца проследили путь иммунологической реакции. Но при этом сделали много допущений, из которых привлеку Ваше внимание лишь к одному. Мы говорили, что Т-ЛИМФОЦИТЫ-ХЕЛПЕРЫ взаимодействуют с антигеном второго порядка, и они приходят к выводу, что тот действительно является антигеном - т.е. по своему химическому строению не имеет аналогов среди миллиардов белков присущих нашему организму. т.е. лимфоцит здесь выступает в качестве какого-то сверх умного зверя, который гораздо уменее нас с Вами. Ибо я очень сомеваюсь, что кто-нибудь из нас способен вспомнить формулу какого-нибудь белка, ну скажем гемоглобина. Естественно, лимфоцит не такой уж умный, это достаточно простая клетка. Но из этого следует,что нужно искать объяснение тому как функционирует система иммунитета в целом. Как отличается свое от чужого. Заранее скажу, что здесь много неясного. Предложено много теорий объясняющих эти процессы, - теория боковых цепей ЭРЛИХА,пряимой и непрямой матрици и т.д. Мы с Вами сейчас поговорим о теории, которая по современным возрениям наиболее полно объясняет все эти явления.
КЛОНАЛЬНО-СЕЛЕКЦИОННАЯ ТЕОРИЯ БЕРНТА Суть этой теории заключается в следующем. В процессе эмбриогенеза иммунокампетентная система формируется достаточно поздно, тогда когда сформированы уже основные структуры и органы организма. Начало формирования иммунокомпетентной системы связано с активным размножением лимфоидных клеток, и формированием громадного множества клонов лимфоцитов. Клон - это потомство одной лимфоидной клетки способной образовать антитела только лишь к одному какому-нибудь антигену. Но поскольку клонов много, то любому антигену, который в принципе может встретится в природе, в том числе и к собственным белкам, в организме существует клон лимфоцитов. И если антиген попадает в организм, соответствующий клон начинает вырабатывать против него антитела. Однако на первом этапе развития (в эмбриональный период) лимфоциты не в состоянии образовывать антитела. Более того, тот клон лимфоцитов, который встретил свой антиген погибает. Ну а встречают свои антиген прежде всего те лимфоциты, которые способны образовывать антитела к собственным белкам и тканям организма. Таким образом, когда иммунокомпетентная система достигает зрелости и становится способной синтезировать антитела, то в организме нет клеток могущих синтезировать антитела к собственными тканям, и есть клетки, которые могут синтезировать антитела к чему угодно остальному. В таком виде БЕРНЕТ сформулировал свою теорию примерно четверть века назад. В основном его положения подтвердились. Те клоны лимфоцитов,которые способны синтезировать антитела к собственным тканям в действительности не погибают, а вытормаживаются соответствующими клонами Т-ЛИМФОЦИТОВ СУПРЕССОРОВ. То обстоятельство, что они не погибают, создает предпосылки для развития иммунологических реакций по отношению к собственными тканям, так называемых аутоиммунных процессов. Эти аутоиммуные процессы возникают в том случае, если активность клеток СУПРЕССОРОВ оказывается недостаточной.
Вопросы к занятию.
1. Общая характеристика клеток, синтезирующих иммуноглобулины.
2. Строение мономера иммуноглобулинов.
3. Структурно-функциональные особенности иммуноглобулинов различных классов.
4. Понятия валентности, аффинности,авидности антитела.
Плазматические клетки. Еще находясь на стадии плазмобластов, будущие продуценты антител покидают лимфатические узлы и селезенку. В конечном счете, большинство этих клеток попадает в костный мозг (40–45%) и слизистые оболочки, преимущественно кишечника (33–35%). Во вторичных лимфоидных органах остается меньше 25% антителообразующих клеток (7–8% в селезенке и 15–17% в лимфатических узлах). В слизистых оболочках плазмоциты локализуются в lamina propria и подслизистом слое, в коже - в дерме. Зрелые плазматические клетки полностью утрачивают подвижность, а также способность реагировать практически на все внешние стимулы. Это обусловлено потерей характерных для В-клеток мембранных молекул - иммуноглобулинов и других компонентов BCR, молекул MHC, костимулирующих молекул. Наиболее характерный мембранный маркер плазмоцитов - белок синдикан (CD138), участвующий во взаимодействии плазматических и стромальных клеток.
Плазматические клетки имеют большой размер (20 мкм и более). Для ядра этих клеток характерна периферическая конденсация хроматина. Цитоплазма характеризуется большим объемом, базофилией и сильно развитым аппаратом синтеза белка (разветвленный эндоплазматический ретикулум, рибосомы, аппарат Гольджи). Цитоплазма имеет максимальный объем на стадии незрелой плазматической клетки, которая еще сохраняет способность к делению. Зрелые плазмоциты представляют собой образец высокоспециализированных клеток. До 50% матричной РНК в зрелых плазматических клетках кодирует иммуноглобулин, на долю которого приходится около 30% синтезируемого белка. Каждая плазматическая клетка синтезирует и секретирует антитела одного изотипа, аллотипа, идиотипа и одной специфичности.
Антитела относятся к γ-глобулиновой фракции белков сыворотки крови. На долю γ-глобулинов приходится 15-25 % белкового содержания сыворотки крови, что составляет примерно 10-20 г/л. Поэтому антитела получили название иммуноглобулинов , и их обозначают символом Ig . Следовательно, антитела - это γ-глобулииы , вырабатыва емые в ответ на введение антигена, способ ные специфически связываться с антигеном и участвовать во многих иммунологических реакциях .
Антитела синтезируются В-лимфоцитами и их потомками - плазматическими клетками.
Иммуноглобулины существуют :
в циркулирующей форме,
в виде рецепторных молекул на иммунокомпетентных клетках
миеломных белков.
Циркулирующие антитела подразделяются на сывороточные и секреторные. К антителам могут быть также отнесены белки Бенс-Джонса, которые являются фрагментами молекулы Ig (его легкая цепь) и синтезируются в избытке при миеломной болезни.
Молекулярное строение антител
Иммуноглобулины являются гликопроте идами.
Молекулы Ig, несмотря на их видимое разнообразие, имеют универсальное строение .
две тяжелые цепи
две легкие .
Обозначают их как Н- (от англ. heavy - тяжелый) и L- (от англ. light - легкий) цепи.
Тяжелые и легкие цепи связаны между собой попарно дисульфидными связями (- S - S -).
Между тяжелыми цепями также есть дисульфидная связь. Это так называемый «шар нирный» участок . Такой тип межпептидного соединения придает структуре молекулы динамичность - он позволяет легко менять конформацию в зависимости от окружающих. Шарнирный участок ответствен за взаимодействие с первым компонентом комплемента (С1) и активацию его по классическому пути.
Легкие цепи бывают 2 типов : (каппа и лямбда).
Тяжелых цепей известно 5 типов : (альфа, гамма, мю, эпсилон и дельта), - которые имеют также и внутреннее подразделение.
Домены различаются по постоянству аминокислотного состава. Выделяют С-домены (от англ. constant - постоянный), с неизменной, или постоянной, структурой полипептидной цепи, и V -домены (от англ. variable - изменчивый), с переменной структурой .
В составе легкой цепи есть по одному V- и С-домену, а в тяжелой - один V- и 3-4 С-домена.
Вариабельные домены легкой и тяжелой цепи совместно образуют участок, который специфически связывается с антигеном. Это антигенсвязывающий центр молекулы Ig или паратоп – Fab -фрагмент.
Fc (от англ. «фрагмент кристаллизующийся»)- фрагмент. Он ответствен за связывание с рецепторами на мем бране клеток макроорганизма (Fc -рецепторы) и некоторыми микробными суперантигенами (например, белком А стафилококка).
Помимо вышеописанных, в структуре молекул Ig обнаруживают дополнительные полипептидные цепи. Так, полимерные молекулы IgM и IgA содержат J -пептид (от англ. join - соединяю). Он объединяет отдельные мономеры в единое макромолекулярное образование и обеспечивает превращение полимерного Ig в секреторную форму.
Молекулы секреторных Ig в отличие от сывороточных обладают особым S -пептидом (от англ. secret - секрет). Это так называемый секреторный компонент. Секреторный компонент - продукт деградации рецептора эпителиальной клетки к J-пептиду. Он обеспечивает перенос молекулы Ig через эпителиальную клетку в просвет органа (трансцитоз) и предохраняет ее в секрете слизистых от ферментативного расщепления.
Структурно-функциональные особенности иммуноглобулинов различных классов
В зависимости от особенностей молекулярного строения тяжелой цепи (т. е. наличия изотопических, или групповых антигенных детерминант) различают 5 классов , или изотипов Ig .
а-типа, относят к изотипу А (сокращенно IgA);
IgD обладает δ-цепью,
IgE- ε-цепью,
IgG- γ-цепью
IgM - μ-цепью.
Соответственно особенностям строения подтипов тяжелых цепей различают и подклассы Ig.
В структуре молекул Ig разных классов прослеживается общая закономерность - все они построены из одних и тех же элементов, которые были описаны. Однако для каждого изотипа характерны свои особенности. В частности, IgD , IgE и IgG имеют мономерное строение , IgM - практически всегда является пентамером , а молекула IgA может быть моно-, ди- и тримером.
Иммуноглобулин класса G . Изотип G составляет основную массу Ig сыворотки крови. На его долю приходится 70-80 % всех сывороточных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости. Среднее содержание IgG в сыворотке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Этот уровень достигается к 7-10-летнему возрасту. Период полураспада IgG - 21 день.
IgG - мономер, имеет 2 антигенсвязы вающих центра (может одновременно связать 2 молекулы антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы Gl , G 2, G 3 и G 4 .
Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами (В у) и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном иммунном ответе.
Обладает высокой аффинностью .
IgGl и IgG 3 связывают комплемент , причем G3 активнее, чем Gl.
IgG 4, подобно IgE , обладает цитофильностью (тропностью, или сродством, к тучным клеткам и базофилам) и участвует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических реакциях IgG может проявлять себя как неполное антитело.
Легко проходит через плацентарный барь ер и обеспечивает гуморальный иммунитет новорожденного в первые 3-4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко путем диффузии.
IgG обеспечивает:
![](/uploads/hidob-cy-570x641.png)
Иммуноглобулин класса М. Наиболее крупная молекула из всех Ig. Это пентамер, который имеет 10 антигенсвязывающих центров, т. е. его валентность равна 10 . Молекулярная масса его около 900 кДа, константа седиментации 19S. Различают подтипы Ml и М2 . .Тяжелые цепи молекулы IgM в отличие от других изотипов построены из 5 доменов. Период полураспада IgM - 5 дней.
На его долю приходится около 5-10 % всех сывороточных Ig. Среднее содержание IgM в сыворотке крови здорового взрослого человека составляет около 1 г/л. Этот уровень у человека достигается уже к 2-4-летнему возрасту.
IgM филогенетически - наиболее древний иммуноглобулин. Синтезируется предшественниками и зрелыми В-лимфоцитами (В ц). Образуется в начале первичного иммунного ответа, также первым начинает синтезироваться в организме новорожденного - определяется уже на 20-й неделе внутриутробного развития.
Обладает высокой авидностью , наиболее эффективный активатор комплемента по клас сическому пути . Участвует в формировании сывороточного и секреторного гуморального иммунитета. Являясь полимерной молекулой, содержащей J-цепь, может образовывать секреторную форму и выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко Большая часть нормальных антител и I изоагглютининов относится к IgM.
Не проходит через плаценту. Обнаружение специфических антител изотипа М в сыворотке крови новорожденного указывает на бывшую внутриутробную инфекцию или дефект плаценты.
IgM обеспечивает:
нейтрализацию,
опсонизацию маркирование антигена,
осуществляет запуск комплемент-опосредованного цитолиза
антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.
Иммуноглобулин класса А. Существует в сывороточной и секреторной формах. Около 60 % I всех IgA содержится в секретах слизистых. Сывороточный IgA : На его долю приходится около 10-15 % всех сывороточных Ig. В сыворотке крови здорового взрослого человека содержится около 2,5 г/л IgA, максимум достигается к 10-летнему возрасту. Период полураспада IgA - 6 дней.
IgA - мономер , имеет 2 антигенсвязывающих центра (т. е. 2-валентный), молекулярную массу около 170 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы А1 и А2 .
Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами (В а) и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном иммунном ответе.
Обладает высокой аффинностью . Может быть неполным антителом. Не связывает комплемент .
Не проходит через плацентар ный барьер.
IgA обеспечивает :
нейтрализацию,
опсонизацию
маркирование антигена,
осуществляет запуск антителозависимой клеточно-опос-редованной цитотоксичности.
Секреторный IgA : В отличие от сывороточного, секреторный IgA (slgA) существует в полимерной форме в виде ди- или тримера (4- или 6-валентный) и содержит J- и S-nenтиды. Молекулярная масса 350 кДа и выше, константа седиментации 13S и выше.
Синтезируется В а -лимфоцитами и их потомками - плазматическими клетками соответствующей специализации только в пределах слизистых и выделяется в их секреты. Объем продукции может достигать 5 г в сутки. Пул slgA считается самым многочисленным в организме - его количество превышает суммарное содержание IgM и IgG. В сыворотке крови slgA не обнаруживается.
Формирование молекулы slgA происходит при прохождении через эпителиальную клетку, где он присоединяется к секреторному компоненту. На базальной и латеральной поверхности эпителиальная клетка несет рецептор к J-цепи полимерной молекулы Ig (JR). Образующийся после взаимодействия этого рецептора с полимерной молекулой IgA комплекс эндоцитиру-ется клеткой в виде везикулы. Затем везикула переносится к апикальной поверхности эпите-лиоцита, где JR подвергается ферментативному расщеплению. В итоге IgA высвобождается в слизистый секрет просвета органа уже в секреторной форме - оставшийся прикрепленным к молекуле Ig фрагмент JR является S-цепью.
Секреторная форма IgA - основной фактор специфического гуморального местного иммунитета слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы и респираторного тракта. Благодаря S-цепи он устойчив к действию протеаз. slgA не активирует комплемент, но эффективно связывается с антигенами и нейтрализует их. Он препятс твует адгезии микробов на эпителиальных клетках и генерализации инфекции в преде лах слизистых.
Иммуноглобулин класса Е. Называют так же реагином . Содержание в сыворотке крови крайне невысоко - примерно 0,00025 г/л. Обнаружение требует применения специальных высокочувствительных методов диагностики. Молекулярная масса - около 190 кДа, константа седиментации - примерно 8S, мономер. На его долю приходится около 0,002 % всех циркулирующих Ig. Этот уровень достигается к 10-15 годам жизни.
Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами (В е) и плазматическими клетками преимущественно в лимфоидной ткани бронхолегочного дерева и ЖКТ.
Не связывает комплемент .
Не проходит че рез плацентарный барьер.
Обладает выраженной цитофильностыо - тропностыо к тучным клеткам и базофилам. Участвует в развитии гиперчувствительности немедленного типа - реакция I типа .
Иммуноглобулин класса D . Сведений об Ig данного изотипа не так много. Практически полностью содержится в сыворотке крови в концентрации около 0,03 г/л (около 0,2 % от общего числа циркулирующих Ig). IgD имеет молекулярную массу 160 кДа и константу седиментации 7S, мономер.
Не связывает комплемент. Не проходит через плацентарный барьер. Является рецептором предшественников В-лимфоцитов.
Рецепторные иммуноглобулины. Рецепторные, или мембраные Ig, локализуются на цитоп лазматической мембране В-лимфоцитов. Выполняют функции антигенспецифических рецепторов. Рецепторные Ig имеют те же изотип и специфичность, что и синтезируемые в межклеточную среду антитела. Структурное отличие от секретируемых антител заключается в особом, дополнительном М-пептиде , благодаря которому молекула рецепторного Ig фиксируется в цитоплазматической мембране иммунокомпетентной клетки.
Нормальные антитела. В сыворотке крови человека всегда определяется базальный уровень иммуноглобулинов, которые получили название нормальных, или естественных, антител. К нормальным антителам относят изогемагглютинины - антитела различной аффинности и специфичности направленные против эритроцитарных антигенов групп крови (система АВО), а также против бактерий кишечной группы, кокков и некоторых вирусов. Эти антитела постоянно образуются в организме без явной антигенной стимуляции. С одной стороны, они отражают готовность макроорганизма к иммунному реагированию, а с другой - могут свидетельствовать об отдаленном контакте с антигеном.
Моноклональные антитела. Каждый В-лимфоцит и его потомки, образовавшиеся в результате пролиферации (т. е. клон), способны синтезировать антитела с паратопом строго определенной специфичности. Такие антитела получили название моноклональных. В природных условиях макроорганизма получить моноклональные антитела практически невозможно. Дело в том, что на одну и ту же антигенную детерминанту одновременно реагируют до 100 различных клонов В-лимфоцитов, незначительно различающихся антигенной специфичностью рецепторов и, естественно, аффинностью. Поэтому в результате иммунизации даже
монодетерминантным антигеном мы всегда получаем поликлональные антитела.
Принципиально получение моноклональных антител выполнимо, если провести предварительную селекцию антителопродуцирую-щих клеток и их клонирование (т. е. выделение отдельных клонов в чистые культуры). Однако задача осложняется тем, что В-лимфоциты, как и другие эукариотические клетки, имеют ограниченную продолжительность жизни и число возможных митотических делений.
Проблема получения моноклональных антител была успешно решена Д. Келлером и Ц. Мильштейном (1975). Авторы получили гибридные клетки путем слияния иммунных В-лимфоцитов с миеломной (опухолевой) клеткой. Полученные гибриды обладали специфическими свойствами антителопро-дуцента и «бессмертием» раковотрансфор-мированной клетки. Такой вид клеток получил название гибридом. Гибридома хорошо размножается в искусственных питательных средах и в организме животных и в неограниченном количестве вырабатывает антитела. В результате дальнейшей селекции были отобраны отдельные клоны гибридных клеток, обладавшие наивысшей продуктивностью и наибольшей аффинностью специфических антител.
Гибридомные моноклональные антитела нашли широкое применение при создании диагностических и лечебных иммунобиологических препаратов.
Полные и неполные антитела.
Среди многообразия Ig выделяют:
неполные антитела.
Деление основано на способности образовывать в реакции агглютинации или преципитации ( in vitro ) хорошо различимую глазом макромолекулярную структуру гигантского иммунного комплекса. Таким свойством обладают полные антитела . К ним относятся полимерные молекулы Ig (изотип М), а также некоторые IgA и IgG.
Неполные антитела лишены такой способности, несмотря на то что они специфически связываются с антигеном. В связи с этим их еще называют непреципитирующими или блокирующими антителами. Причиной этого явления может быть экранирование одного из антигенсвязывающих центров мономерной молекулы Ig, а также недостаточное число или малая доступность антигенных детерминант на молекуле антигена. Выявить неполные антитела можно при помощи реакции Кумбса - путем использования «вторых», ан- тииммуноглобулиновых антител.
Другие виды антител. Помимо вышеприведенных различают тепловые и холодовые ан титела. Первые взаимодействуют с антигеном при температуре +37 °С. Для вторых наибольшая эффективность связывания проявляется в диапазоне +4... -10 °С. Понижение температуры реакционной смеси позволяет в ряде случаев (например, при отсутствии специфического антигена) ограничить низкоаффинные взаимодействия и повысить специфичность реакции.
По способности активировать комплемент (классический путь) антитела подразделяются на комплементсвязывающие (IgM, IgGl и IgG3) и комплементнесвязывающие.
В последние годы открыт вид антител, которые выполняют функции катализаторов биохимических процессов - обладают протеазной или нуклеазной активностью. Это реликтовые свойства антител. Такие антитела получили название абзимы .
Большим достижением молекулярной биологии в области иммунологии, помимо гибридом, явилось получение белков со свойствами антител - это одноцепочечные антитела, бифункциональные антитела и иммунотокси-ны. Они синтезируются живыми биологическими системами. Одноцепочечные антитела представляют собой фрагмент вариабельного домена Ig, который обладает определенной специфичностью и аффинностью и способен к блокирующему действию. Размер такой молекулы очень мал и практически не обладает иммуногенностью. Бифункциональные антитела имеют антигенсвязывающие центры разной специфичности, т. е. направлены к различным антигенным детерминантам. Иммунотоксины представляют собой гибрид молекулы иммуноглобулина и токсина. Они способны направленно доставить молекулу токсина к клетке-мишени, убить ее или нарушить в ней метаболические процессы.
Иммунотоксины и бифункциональные антитела имеют большое будущее. В перспективе их будут использовать для иммунодиагностики, а также профилактики и лечения инфекционных, онкологических, аллергических и других заболеваний.
Механизм взаимодействия антитела с антигеном
В процессе взаимодействия с антигеном принимает участие не вся молекула Ig, а лишь ее ограниченный участок - антигенсвязывающий центр, или паратоп, который локализован в Fab -фрагменте молекулы Ig. Co своей стороны, антитело взаимодействует не со всей молекулой антигена сразу, а лишь с ее антигенной детерминантой.
Антитела отличает специфичность взаимодействия, т. е. способность связываться со строго определенной антигенной детерминантой. Наиболее доступные для взаимодействия эпитопы располагаются на поверхности молекулы антигена.
Связь антигена с антителом осуществляется за счет слабых взаимодействий (ван-дерваальсовы силы, водородные связи, электростатические взаимодействия) в пределах антигенсвязывающего центра. Такая связь отличается неустойчивостью - образовавшийся иммунный комплекс (ИК) может легко диссоциировать на составляющие его компоненты. Поэтому взаимодействие антигена и антитела может быть представлено в виде уравнения:
[АГ] + [ AT ] « [ИК].
Продолжительность существования иммунного комплекса определяется целым рядом факторов. При этом важное значение имеют особенности антитела, антигена и условия, в которых происходит их взаимодействие.
К особенностям антитела следует отнести его аффинность и авидность.
Аффинность - сила специфического взаимодействия антитела с антигеном (или энергия их связи). Эта характеристика зависит от степени стерического, или пространственного, соответствия (комплементарности) структуры антигенсвязывающего центра и антигенной детерминанты. Чем выше их комплементарность, т. е. чем больше они подходят друг другу, тем больше образуется межмолекулярных связей и тем выше будет устойчивость и продолжительность жизни образовавшегося иммунного комплекса. Структурные несоответствия антигенсвязывающего центра и антигенной детерминанты существенно снижают число образующихся связей и прочность взаимодействия антитела с антигеном. Иммунный комплекс, образованный низкоаффинными антителами, чрезвычайно неустойчив, имеет малую продолжительность существования и быстро распадается на исходные компоненты.
Установлено, что в условиях макроорганизма с одной и той же антигенной детерминантой способны одновременно прореагировать и образовать иммунный комплекс около 100 различных клонов антител. Все они будут отличаться структурой антигенсвязывающего центра и аффинностью.
Аффинность антител существенно меняется в процессе иммунного ответа в связи с селекцией наиболее специфичных клонов В-лимфоцитов. Наименее аффинными считаются нормальные антитела. По расчетам, общее число различных антигенспецифических клонов В-лимфоцитов достигает 10 6 -10 7 .
Под термином «авидность» понимают прочность связывания антитела и антигена. Эта характеристика определяется аффинностью Ig и числом антигенсвязывающих центров. При равной степени аффинности наибольшей авид-ностью обладают антитела класса М, так как они имеют 10 антигенсвязывающих центров.
Особенности антигена также влияют на эффективность его взаимодействия с антителом. Так, важное значение имеют стерическая (пространственная) доступность антигенной детерминанты для антигенсвязывающего центра молекулы Ig и число эпитопов в составе молекулы антигена.
Эффективность взаимодействия антитела с антигеном существенно зависит от усло вий, в которых происходит реакция, и прежде всего от рН среды, осмотической плотности, солевого состава и температуры среды. Оптимальными для реакции антиген-антитело являются физиологические условия внутренней среды макроорганизма: близкая к нейтральной реакция среды, присутствие фосфат-, карбонат-, хлорид- и ацетат-ионов, осмолярность физиологического раствора (концентрация раствора 0,15 М), а также температура (36-37 °С).
Свойства антител
Благодаря уникальной способности специфически связываться с антигенными детерминантами, антитела выполняют в организме ряд важнейших функций, как форма иммунного реагирования и фактор регуляции иммунореактивности. При этом необходимо дифференцировать эффекты специфического, высокоаффинного взаимодействия и неспецифического, низкоаффинного.
В результате специфического взаимодейс твия эпитопа молекулы антигена с паратопом молекулы антитела может образоваться устойчивый иммунный комплекс с продолжительностью жизни, достаточной для про явления эффекторных свойств молекулы им муноглобулина.
Эффекторная функция антител
Это означает, что благодаря своим уникальным способностям антитела могут оказывать прямое или опосредованное воздействие на молекулы антигена:
нейтрализовать или маркировать антиген,
вызвать его деструкцию или элиминацию.
К прямым эффектам антител относится нейтрализация. Она достигается путем связывания и блокирования паратопом иммуноглобулина активного центра биологически активной молекулы, например, токсина, рецептора, лекарственного препарата и пр. Эффект имеет обратимый характер в случае распада иммунного комплекса и требует подключения других механизмов иммунной защиты (фагоцитоз, лизис). На принципе нейтрализации основан механизм действия антитоксических, противовирусных и многих других лечебных иммунных сывороток.
Энзиматическое действие антител также относится к прямым эффектам. Они связаны со стабильной областью V-домена L-цепи. Благодаря реликтовой протеазной или нуклеазной, иммуноглобулины способны вызывать деструкцию молекулы антигена (например, расщепление отдельных пептидов или ДНК).
В большинстве случаев взаимодействие антител с антигеном в организме не влечет за собой непосредственно нейтрализацию биологического действия последнего, а также его разрушение или утилизацию. Прочно связываясь с эпиопом, антитела «маркируют» молекулу антигена - обозначают его как мишень для факторов элиминации или деструкции (фагоцитоз, лизис).
Похожие статьи
-
Пирог «Шарлотка» с сушеными яблоками Пирожки с сушеными яблоками
Пирог с сушёными яблоками был очень популярен в деревнях. Готовили его обычно в конце зимы и весной, когда убранные на хранение свежие яблоки уже кончались. Пирог с сушёными яблоками очень демократичен - в начинку к яблокам можно...
-
Этногенез и этническая история русских
Русский этнос - крупнейший по численности народ в Российской Федерации. Русские живут также в ближнем зарубежье, США, Канаде, Австралии и ряде европейских стран. Относятся к большой европейской расе. Современная территория расселения...
-
Людмила Петрушевская - Странствия по поводу смерти (сборник)
В этой книге собраны истории, так или иначе связанные с нарушениями закона: иногда человек может просто ошибиться, а иногда – посчитать закон несправедливым. Заглавная повесть сборника «Странствия по поводу смерти» – детектив с элементами...
-
Пирожные Milky Way Ингредиенты для десерта
Милки Вэй – очень вкусный и нежный батончик с нугой, карамелью и шоколадом. Название конфеты весьма оригинальное, в переводе означает «Млечный путь». Попробовав его однажды, навсегда влюбляешься в воздушный батончик, который принес...
-
Как оплатить коммунальные услуги через интернет без комиссии
Оплатить услуги жилищно-коммунального хозяйства без комиссий удастся несколькими способами. Дорогие читатели! Статья рассказывает о типовых способах решения юридических вопросов, но каждый случай индивидуален. Если вы хотите узнать, как...
-
Когда я на почте служил ямщиком Когда я на почте служил ямщиком
Когда я на почте служил ямщиком, Был молод, имел я силенку, И крепко же, братцы, в селенье одном Любил я в ту пору девчонку. Сначала не чуял я в девке беду, Потом задурил не на шутку: Куда ни поеду, куда ни пойду, Все к милой сверну на...